Preparazione è Requirements di Chicken Adrenomedullin (ADM) Reagent

1. Serum: coagulation à a temperatura di l'ambienti per 10-20 min, centrifugazione per 20 min à a veloce di 2000-3000 r.pm. Raccogliere il surnatante con cura e centrifugare nuovamente se la precipitazione appare durante l'almacenamento.

2. Plasma: EDTA o citrate di sodiu deve esse sceltu cum'è l'anticoagulant secondu i bisogni di u specimen. Dopu à mischjà per 10-20 minuti, centrifuge per 20 minuti à a velocità di 2000-3000 r.pm. Raccogliere il surnatante con cura e centrifugare nuovamente se si formano precipitazioni durante l'almacenamento.

3. Urine: cullà cù un tubu sterile, centrifuga per 20 minuti à a velocità di 2000-3000 r.pm. Raccogliere il surnatante con cura e centrifugare nuovamente se si formano precipitazioni durante l'almacenamento. Fluid toracicu è addominale, implementazione di riferimentu di fluidu cerebrospinale.

4. Supernatant di cultura di cellula: cullighjate cù un tubu sterile quandu si rilevanu cumpunenti exudatori. Centrifuga per 20 minuti à a velocità di 2000-3000 r.pm. Raccoglie u supernatant cun cura. Quandu si rilevanu i cumpunenti in i celluli, a sospensjoni cellulare hè stata diluita cù PBS (pH 7,2-7,4), è a cuncentrazione di e cellule righjunghji circa 1 milione / mL. Attraversu a congelazione è u scongelu ripetuti, e cellule sò distrutte è i cumpunenti intracellulari sò liberati. Centrifuga per 20 minuti à a velocità di 2000-3000 r.pm. Raccoglie u supernatant cun cura. Se si forma a precipitazione durante a preservazione, centrifuga di novu.

5. Tissue specimen: Dopu avè tagliatu u specimenu, pesa. Aghjunghjite una certa quantità di PBS, PH7.4. Criopreservazione rapida in nitrogenu liquidu per u usu dopu. U specimenu ferma à una temperatura di 2-8 gradi dopu a funnu. Una certa quantità di PBS (PH7.4) hè stata aghjunta, è u specimenu hè statu homogeneizatu cumplettamente cù a manu o cù un homogenizer. Centrifuga per 20 minuti à a velocità di 2000-3000 r.pm. Raccoglie u supernatant cun cura. Divide unu per a prova è congelate u restu per riserva.

6. Specimens deve esse estratti u più prestu pussibule dopu a cullizzioni. L'estrazione deve esse realizatu secondu a literatura pertinente, è l'esperimenti deve esse realizatu u più prestu pussibule dopu l'estrazione. Se a prova ùn pò esse realizata immediatamente, u specimenu pò esse guardatu à -20 gradi, ma si deve esse evitata a congelazione è u scongelu ripetutu.

7. Ùn pò micca detectà a mostra chì cuntene NaN3, perchè NaN3 impedisce l'attività HRP.