Kit di rilevazione ELISA di anticorpi di virus di rinotracheite bovina infettiva

Model No: VD105E
Abbr.: IBRV Ab Elisa
Specimen : serum

Descrizzione

Specificazione

BVDV Ab Elisa

Usu destinatu: InfizziosaVirus di rinotracheite bovinaAntibody ELISA Detection Kit hè adupratu perDeterminà a rinotracheitis infettivaanticorpi virali in serum bovino in vitro.

Specimen: serum

Materiali furniti:

Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus Antibody ELISA Detection Kit

Prucedure di prova è Interpretazione

STEP 1 Prucedura di prova

1.1 Preparazione di a Soluzione Lavata

Wcuncentrazione orking wliquidu di cenere:Prima di l'usu, a suluzione di lavà deve esse restituita à a temperatura di l'ambienti (20-25 gradi) è scuzzulate uniformemente per rende uniforme. Allora dilute 20 volte a suluzione di lavatura cuncentrata cù l'acqua purificata (per esempiu, a suluzione di lavà cuncentrata 5ml hè aghjuntu à 95ml d'acqua purificata), mischjà bè, è u liquidu di lavà diluted pò esse guardatu à 2-8 gradi per 7 ghjorni.

1.2 Preparazione di mostra

① U sangue di l'animali sanu hè statu pigliatu, centrifugatu à 4000 rpm per 10 minuti, è u supernatant hè statu cullatu. U serum pò ancu esse coagulatu naturalmente senza hemolysis.

② Dilute u serum per esse testatu 50 volte in a piastra di diluzione di serum (per esempiu: aghjunghje 3ul di serum per esse pruvatu à 147ul di diluente di mostra).

Nota: i cuntrolli negativi è pusitivi ùn anu micca bisognu di diluzione

1.3 Prucedura di prova

①Pigliate l'etichetta di l'enzima Microplate (sicondu u numeru di campioni, pò esse disassemblatu è utilizatu parechje volte), aghjunghje 100ul di u serum diluitu à l'etichetta enzyme Microplate, fate dui pozzi per u cuntrollu negativu è u cuntrollu pusitivu, è aghjunghje 100ul à a reazione bè rispettivamente. Scuzzulate delicatamente a mostra in u pozzu, usendu a film di u platu di sigillatura per copre a piastra, è incubate à 37 gradi per 30 minuti.

②Apri u filmu di a piastra di sigillatura, scuzzulate a suluzione in u pozzu di a piastra, aghjunghje 300 µl di liquidu di lavatu di cuncentrazione di travagliu à ogni pozzu, è poi scartate u liquidu in u pozzu. Repetite i passi sopra 5 volte, è infine asciucà nantu à una carta assorbente pulita.

③Conjugate enzyme diluted: Dilute l'enzyme conjugate (80×) 80 volte (per esempiu: 10ul di conjugate enzyme cuncentrate + 790ul diluente di mostra, a quantità specifica necessaria hè calculata secondu u numeru di campioni di prova), mischjà bè è mette da parte.

④Aghjunghje 100µl di Enzyme Conjugate à ogni pozzu, copre a piastra, è incubate à 37 gradi per 30 minuti.

⑤Lavandu a piastra di l'enzima, l'operazione specifica hè a stessa cum'è sopra ②.

⑥Aghjunghje 100µl di suluzione di substratu à ogni pozzu, copre a piastra è incubate per 10 minuti à 37 gradi luntanu da a luce.

STEP 2 Interpretazione di u risultatu

U valore OD450 di ogni pozzu hè statu lettu nantu à u lettore di microplate 96-well.

2.1 Validazione U valore mediu OD450nm di cuntrollu negativu era <0.25 è u valore mediu OD450nm di cuntrollu pusitivu era più grande o uguale à 0.6, i risultati spirimintali eranu validi. Altrimenti, a prova deve esse ripetuta.

2.2 Metudu di calculu

Per ogni mostra, calculate u S/P cum'è seguitu cù l'esemplari corretti è i valori di cuntrollu:

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2.3 Interpretazione di u risultatu

Quandu S / P < 0,2, hè ghjudicatu cum'è negativu.

Quandu S/P> 0,3, hè ghjudicatu cum'è pusitivu.

Quandu 0,2 Meno o uguale à S/P Meno o uguale à 0,3, hè ghjudicatu cum'è suspettu, è suggerisce di ripetiri u campionamentu è a prova una settimana dopu.

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